病毒基因組DNA快速提取試劑he
采用特異性結(jié)合病毒DNA 的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),病毒DNA提取試劑he適合于從無(wú)細(xì)胞體液,包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA。病毒基因組DNA快速提取試劑he
病毒基因組DNA快速提取試劑盒
病毒基因組DNA快速提取試劑he
目錄號(hào):40410
試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性:
試劑盒組成 | 保存 | 50次 (40317-50) |
裂解液DLB | 室溫 | 20ml |
去蛋白液RE | 室溫 | 25ml |
漂洗液WB | 室溫 | 15ml |
第一次使用前按說(shuō)明加指ding量乙醇 | ||
洗脫緩沖液EB | 室溫 | 15ml |
吸附柱AC | 室溫 | 50個(gè) |
收集管(2ml) | 室溫 | 50個(gè) |
室溫儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果, 各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
產(chǎn)品介紹:
采用特異性結(jié)合病毒DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),病毒DNA提取試劑he適合于從無(wú)細(xì)胞體液,包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA。該產(chǎn)品可以滿足絕大多數(shù)的病毒DNA的提取要求, 如病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨細(xì)胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA后在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化后的病毒核酸無(wú)雜質(zhì)和PCR抑制劑,可直接適用于PCR、酶切、雜交等分析。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 不需要使用有毒的苯fen等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2. 節(jié)省時(shí)間,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在20分鐘內(nèi)完成。
3. 多次柱漂洗確保高純度,提取的病毒DNA純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,可適用于各種操作,包括PCR、酶切、雜交等。
操作步驟:(實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng))
提示:第一次使用前請(qǐng)先在15ml漂洗液WB中加入60ml無(wú)水乙醇,充分混勻,加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200μl血清等體液(需回復(fù)到室溫,不足可用0.9% NaCl或者PBS補(bǔ)足)轉(zhuǎn)入上述1.5ml離心管,加入400μl 裂解液DLB, 立刻渦旋振蕩充分混勻。
2. 室溫(15-25℃)放置10分鐘,每隔5分鐘,振蕩混勻一次。
3. 加入450μl無(wú)水乙醇,立刻渦旋振蕩充分混勻。
如果周圍環(huán)境高于25℃,乙醇需要冰上預(yù)冷后再加入。
4. 將上述混合物加入一個(gè)吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm離心30-60秒,倒掉收集管中的廢液。
如果總體積超過(guò)750μl,可分兩次將溶液加入同一個(gè)吸附柱AC中。
5. 加500μl去蛋白液RE,12,000rpm離心30秒,棄廢液。
6. 加入500μl漂洗液WB(請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!),12,000rpm 離心30秒,棄廢液,加入500μl漂洗液WB,重復(fù)一遍。
7. 將吸附柱AC放回空收集管中,13,000rpm離心2分鐘,盡量除去漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
8. 取出吸附柱AC,放入一個(gè)新的離心管中,在吸附膜的中間部位加30-50μl 洗脫緩沖液EB(事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好), 室溫放置1分鐘,12,000rpm 離心1分鐘。如果想得到較多量的DNA,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,12,000rpm離心1分鐘。
洗脫體積越大,洗脫效率越高。如果需要DNA濃度較高,可以適當(dāng)減少洗脫體積,但是最小體積不應(yīng)少于20μl,體積過(guò)小降低洗脫效率,減少DNA產(chǎn)量。
9. DNA可以存放在2-8℃,如果要較長(zhǎng)時(shí)間存放,可以放置在-20℃。
病毒基因組DNA快速提取試劑he