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BCA蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0030

  • 型   號:
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-08-28
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

北京諾博萊德科技有限公司供應BCA蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0030量大優(yōu)惠,咨詢 :

BCA蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0030

北京諾博萊德科技有限公司供應BCA蛋白濃度測定試劑盒 NobleRyder P0030量大優(yōu)惠,咨詢 :

 

BCA蛋白濃度測定試劑盒使用說明

試劑盒組成 包裝(500微孔) 保存
 
BCA試劑 100ml 2-8℃
Cu試劑 3ml 2-8℃
PBS稀釋液 30ml 2-8℃
BSA蛋白標準 (5mg/ml BSA) 1ml  -20℃
 
 本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效。本試劑盒用于酶標板或者200ul比色皿時可做500孔。當使用2ml比色皿時可做50孔,如果是1ml比色皿時可做100孔。

產(chǎn)品簡介

堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測結果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。

使用說明

一,微孔酶標儀法

1.         配制工作液: 根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。

2.         稀釋標準品:取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足到20微升。

3.         將樣品作適當稀釋(多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。

4.         各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分鐘。用酶標儀測定A562nm,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結果。

  

二,分光光度計法、

如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。

步驟如下:

1.配制工作液: 根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。

2,  稀釋標準品:取100微升BSA標準品用PBS稀釋至1ml(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。

3,  取八支(或者更多)5ml離心管,標讓號,按下表加入試劑。

離心管號 1 2 3 4 5 6 7(樣品管1) 8(樣品管2) 9(樣品管3)
標準蛋白BSA 0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul適當稀釋的樣品1 200ul適當稀釋的樣品2 ……
PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0
BCA工作液 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
4,  37℃放置15-30分鐘。用分光光度計測562nm處吸光值,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。

北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, FermantasMBI, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關試劑、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。

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